產(chǎn)品詳情
【貨 號(hào)】YKE10240
【產(chǎn)品名稱】
通用名稱：人基質(zhì)金屬蛋白酶13 (MMP-13)定量檢測(cè)試劑盒（ELISA）
英文名稱：Human matrix blloproteinase 13(MMP-13) ELISA kit
【包裝規(guī)格】
96人份/盒
【預(yù)期用途】
僅供科研使用，定量檢測(cè)血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液中MMP-13的濃度。
【檢測(cè)原理】：本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)。特異性抗人 MMP-13 單克隆抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本和生物素化的檢測(cè)抗體，經(jīng)過孵育，樣本中存在的 MMP-13與固相抗體和檢測(cè)抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素 (streptavidin-HRP)。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中 MMP-13的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng)，在 450 nm 波長(zhǎng)測(cè)定吸光度值。
【主要組成成分】
主要成分
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組分 |
規(guī)格 |
數(shù)量 |
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包被微孔板 |
96T |
1板 |
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標(biāo)準(zhǔn)品 |
4000pg/mL |
2管 |
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抗體 |
80uL |
1管 |
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辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素 |
150uL |
1管 |
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10×檢測(cè)緩沖液 |
5mL |
1瓶 |
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標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
5mL |
1瓶 |
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TMB顯色液 |
10mL |
1瓶 |
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TMB終止液 |
10mL |
1瓶 |
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洗滌緩沖液(20X) |
30ml |
1瓶 |
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封板膜 |
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4張 |
注意：使用前請(qǐng)檢查試劑盒中試劑的標(biāo)簽和數(shù)量與表格是否一致
【樣本要求】
樣本類型和采集
細(xì)胞培養(yǎng)上清
300 g 離心 10 分鐘去除沉淀物，即刻檢測(cè), 或者分裝，-20℃以下貯存。
血清樣本
分離管分離血清。在 1000 g 離心之前，使血樣凝集 30 分鐘。吸取血清樣本之后即刻檢測(cè)，或 者分裝，-20℃以下貯存。
血漿樣本
EDTA、枸櫞酸鈉或肝素抗凝收集血漿樣本。1000 g 離心 3 0 分鐘收集樣本。即刻檢測(cè)，或者 分裝，-20℃以下貯存。 本試劑盒可能適用于其它生物學(xué)樣本。
細(xì)胞培養(yǎng)上清、血清和血漿已經(jīng)過驗(yàn)證。
注意：檢測(cè)前，樣本中可見的沉淀必須去除。不要使用嚴(yán)重溶血或高血脂的樣本。 樣本應(yīng)分裝并貯存于-20℃，以避免人MMP-13活性的丟失。如果在 24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)，樣本可以 存放在 2 - 8℃。 避免樣本的反復(fù)凍融。在檢測(cè)前，冷凍樣本應(yīng)該緩慢地恢復(fù)至室溫，輕柔地混勻。
【檢驗(yàn)方法】
試劑準(zhǔn)備
檢測(cè)前請(qǐng)將所有的試劑、樣本恢復(fù)至室溫。 如果濃縮的試劑出現(xiàn)結(jié)晶，37℃溫浴，直至結(jié)晶全部溶解。
1×洗液
吸取 20×濃縮洗液 30 ml 至 1 L 的量筒，加蒸餾水或去離子水至600 ml，輕輕混勻，避免泡 沫。 轉(zhuǎn)移至干凈瓶?jī)?nèi)。2 - 25℃貯存，1×洗液可穩(wěn)定 30 天。
1×檢測(cè)緩沖液
吸取 10×濃縮檢測(cè)緩沖液 5 ml 至 100 ml 量筒，加蒸餾水或去離子水至 50 ml，輕輕混勻，避 免泡沫。 2 - 8℃貯存，1×檢測(cè)緩沖液可穩(wěn)定保存 30 天。
檢測(cè)抗體 稀釋前充分混勻。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本的數(shù)量，用 1×檢測(cè)緩沖液按 1：100 稀釋濃縮的檢 測(cè)抗體。 注意：請(qǐng)?jiān)?30 分鐘內(nèi)使用稀釋后的檢測(cè)抗體。
辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素
稀釋前充分混勻。 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本的數(shù)量，用 1×檢測(cè)緩沖液按 1：100 稀釋濃縮的辣根過氧化物酶標(biāo)記的 鏈霉親和素。 注意：請(qǐng)?jiān)?30 分鐘內(nèi)使用稀釋后的辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素。
